程颖：循环细胞在小细胞肺癌临床研究里面的进展

反应器细胞膜( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检新种”，已在移出持续性肺癌、癌和结癌当中用于HRS口碑。小细胞膜心脏病(Small celllung cancer，SCLC)组织新种来源太低，且依赖于合理的追踪病情恶化移出和预期HRS的生物深入研究课题。持续发展学者CTCs在SCLC当中的针灸系统设计顺利进行了探讨持续性深入研究，推断出CTCs对SCLC的诊疗、应于，追踪病情恶化、移出，指称标、HRS以及建立个体疗程具体方法计划等不具最重要意涵，本文就CTCs在SCLC针灸系统设计当中的深入研究进展予以流行病学。

一、SCLC病变CTCs的测定工具

CTCs的测定工具主要有流式细胞膜测定技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)技术和细胞膜膜滤过分离细胞膜技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其当中CellSearch系统因其半自动化的操作的平台，较高的依赖持续性、诱发和可重复持续性，成为最常系统设计的CTCs测定工具。

更早在2004年，Allard等率先系统设计CelISearch具体方法测定了99亦然心脏病（未列举SCLC亦然数）病变的CTCs，随后Nagrath等转用CTC-chip具体方法测定了55亦然心脏病病变水肿滴血C TCs。2009年之后的深入研究多转用CeIISearch具体方法测定SCI．C病变水肿滴血CTCs，然而该工具由于对依赖于上皮细胞膜特持续性的细胞膜会注意到漏检也许，且与免疫磁珠及抗体结合的CTCs很难行某些全面性的测定，针灸系统设计受到基本上。

持续发展，随着碳纳米管生物技术的发展，基因表达CTCs表面深入研究课题的依赖持续性比对分f修饰的碳纳米管材料结合扰流控技术的CTCs测定的平台的深入研究受到广泛关注，2013年，《自然》（Nature）华尔街日报将CTCs碳纳米管测定选为最具开放持续性和裂解商业价系数的诊疗新工具，成果令人瞩目。但就目前来看，这两项的CTCs测定工具各有利弊，未有深入研究断定哪种工具对SCLC的CTCs测定更有优势。着眼今后，亟需开发依赖持续性、诱发更高的CTCs测定技术，为SCLC的坚实和针灸深入研究带来突破。

二、CTCs在SCLC针灸系统设计当中的深入研究现状

（一）CTCs枚举与SCLC的诊疗、应于

持续发展多项深入研究显示CTCs枚举低水平与SCLC的诊疗、应于有紧密联系0 2009年Tanaka等系统设计CeIISearch具体方法测定了1 50亦然7.5ml水肿滴血CTCs，其当中心脏病1 25亦然、非恶持续性25亦然，心脏病病变还包括116亦然非小细胞膜心脏病(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9亦然SCLC。

深入研究得出SCLC病变CTCs无症状率为66.70-/0（6亦然／9亦然），明显略高于NSCLC病变的CTCs无症状率(胰脏25.9%，鳞癌40.9%；胰脏对比SCLC，P

同年，Hou等系统设计CeIISearch具体方法测定了50亦然初治的SCLC病变水肿滴血CTCs，还包括20亦然基本上期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病变和30亦然广泛期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病变，水平线期ED-SCLC及LD-SCLC病变的当中位CTCs枚举共有237和2个/7.5ml滴血，7亦然未测出CTCs的病变仅有为LD-SCLC，证明CTCs枚举低水平与SCLC应于具体。

相似的得出结论在2012年被日本学者Naito等断定，学者在51亦然SCLC病变当中立用CeIISearch具体方法测定水平线期CTCs低水平，得出ED-SCLC,病变的当中位CTCs枚举为9.5个f 7.5ml滴血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111滴血，进一步证明ED-SCLC病变的CTCs低水平略高于LD-SCLC病变。

（二）CTCs指称标SCLC的及HRS

CTCs否可作为指称标SCLC和HRS的有救指称f,匙学者们一直在探讨的问题。Houi等在2009年通过CellSearch具体方法测定了50亦然SCLC病变(LD-SCLC20亦然，ED-SCLC30亦然)的CTCs，推断出CTCs>300个/7.5ml滴血的病变及CTCs

水平线期CTCs>=50和

在该深入研究当中SCLC病变的HRS指称明系数设定8个/7.5ml滴血，以此将病变分作CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年自始因如此系统设计CellSearch具体方法测定59亦然SCLC病变在水平线期、1心率疗程后及4心率疗程就此结束后外固滴血CTCs低水平，其当中ED-SCLC病变38亦然，LD-SCLC病变2 1亦然c水平线期有43亦然病变(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml滴血，CTCs>215个/7.5ml滴血和CTCs

经过1心率疗程后病变CTCs低水平明显降低，且1心率疗程后CTCs

学者推断CTCs低水平是SCLCHRS的独立影响因子，其当中1心率疗程后CTCs低水平是SCLC和HRS最弱的预期因子。

2013年ASCO发表的ECOG1508深入研究当中，学者先前在155亦然ED-SCLC当中加入基因表达疗具体方法，并对其当中123亦然病变水平线期CTCs顺利进行测定，得出基因表达疗具体方法未能延长ED-SCLC病变的PFS和OS，但推断出水平线期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml滴血的mPFS共有4.4和4.3个月底（P=0.07），OS共有10.7和7.2个月底(P=0.01)。学者认为虽然基因表达疗具体方法没能大幅提高ED-SCLC病变的PFS和OS，但却推断出了CTCs也许是SCLC病变的HRS深入研究课题。

近期，Igawa等先前系统设计OBP-401试验测定SCLC病变水肿滴血CTCso系统设计OBP-401试验测定肺癌和癌症病变CTCs的具体深入研究已有前期报道。深入研究纳入30亦然韧治的SCLC病变，29亦然病变(96%)水肿滴血CTCs无症状。在水平线期，21亦然病变CTCs

（三）CTCs追踪SCLC的病情恶化和移出

这两项的深入研究表明通过测定CTCs的注意到来追踪SCLC的病情恶化和移出不具最重要的针灸意涵o Tanaka等深入研究推断出CTCs低水平‘j 125亦然心脏病病变（还包括9亦然SCLC病变）进展明显具体，特别是与近处移出密切（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者认为CTCs可作为追踪心脏病近处移出的生物标记物。Natio等深入研究推断出SCLC在水平线期、疗具体方法就此结束后及病情恶化后CTCs的无症状率共有68.6%、26.5%和67.6，预设SCLC病情恶化后水肿学CTCs低水平升温，牵涉到近处移出肺脏的比率为0、1和>=2的病变其当中位CTCs枚举共有2.0、7.5和21个/7.5ml滴血,预设CTCs低水平与近处移出肺脏的比率有关，近处移出越多，CTCs枚举更高（p

三、CTCs在SCLC针灸系统设计当中的探讨顺时针

病情恶化和移出是导致病变疗具体方法失败和死亡的主要缘故，及时推断出的病情恶化和移出并采敢积极合理的疗具体方法采取措施可显著大幅提高病变致死率。然而，由于SCLC依赖于很难追踪病情恶化和移出的生物深入研究课题，且常规影像学检查很难推断出扰移出灶及或多或少残余病灶，导致牵涉到病情恶化和移出的SCLC病变必须及时接受诊疗和疗具体方法。

针灸当中部分LD-SCLC的病变HRS相异较大，预设有些基本上期的病变在诊疗时也许已牵涉到了影像学必须推断出的扰移出而成为潜在的广泛期病变。通过测定水肿滴血CTCs的注意到及比率改变从而对SCLC病变体内状态顺利进行动态、动态地追踪和口碑，及时推断出的病情恶化、移出，将有助于针灸医生对疗具体方法适时的把握和疗具体方法策略的选择，但究竟CTCs的比率或改变系数为多少时很难精确反映SCLC的病情恶化或移出亦然不清楚，需要更多的循证中医确凿予以支持。

CTCs在指称标SCLC病变疗具体方法方面的系统设计亦然西北面探讨过渡期，疗具体方法过程当中CTCs比率的改变与SCLC病变疗程的一致持续性及其与SCLC病变放疗适时的选择等问题在今后需大量的针灸深入研究。近5年，对CTCs否可作为SCLC病变HRS指称标的深入研究日渐增多，但SCLC最佳的HRSCTCs指称明系数亦然无定论，争议尚有。

其当中3项来自Hou、Naito、Hiltermann的深入研究将SCLC的HRSCTCs畀定系数分别设定为50、8和2个／7.5ml滴血，相异很大，这也许与深入研究转用的统计学工具不尽相同以及入组样本量较少有关。近期意大利学者Normanno等见解将ED-SCLC和LD-SCLC病变分开深入研究，对水平线期、l心率疗程后CTCs以及疗具体方法前后CTCs的改变系数分别设定HRS指称明系数，为今后的深入研究透过了新的基本概念。笔者所在的科研团队也自始己任不能不SCLC病变HRS最佳CTCs指称明系数的深入研究，结果令人期待。

的个体疗程具体方法是疗具体方法模式的发展顺时针。SCLC病变对疗程药品的反应存在明显的个体相异，其主要缘故也许与复杂的异质持续性、基因表达相异及多态持续性有关。所以，逐步仅仅只是SCLC的线粒体学特持续性对构建真自始意涵上的SCLC个体疗程具体方法尤为最重要。近期不能不学者王洁等深入研究人员通过系统设计单细胞膜基因基因组手段对病变单个CTC顺利进行全线粒体、核苷酸线粒体基因组。

在此项深入研究当中，谢晓亮副教授所制造的多重淬火和亚胺反应器的增量技术(MAIBAC)，成功构建了对病变水肿滴血单个CTC的全线粒体增量和深度基因组，在单个细胞膜低水平探测全线粒体基因拷贝数变异(CNVs)和单核糖变异(SNVs)o单细胞膜低水平CTCs线粒体基因组技术可及时透过如耐药遗传病等个体疗程具体方法所需的最重要信息，同时也为今后SCLC基因表达药品的开发透过技术支持。

SCLC组织新种难以获取，限制了全面性各项检查深入研究的开展，而利用CTCs构建的SCLC反应器细胞膜移植瘤( CTC-derived explants，CDXs)模型，未来会妥善解决这一棘手难题。近期，Hodgkinson等先前将6亦然ED-SCLC病变lOml水肿滴血当中的CTCs提取后注射到持续性疾病激素皮下，结果在4只激素身上转变成了CDXs，证明SCLC病变的CTCs不具致瘤持续性。

同时系统设计CelISearch具体方法测定这6亦然SCLC病变的CTCs，得出成功转变成CDXs的4亦然病变的CTCs枚举仅有>400个／7.5ml滴血，而另外2亦然未转变成CDXs的病变其CTCs枚举共有222和20个／7.5ml滴血，预设SCLC的CTCs致瘤持续性与水肿滴血CTCs教量有关。进一步归纳推断出远比于疗程诱发SCLC，疗程冠心病SCLC病变的CDXs大大减少时长短、生长更迅速。对3亦然CDXs给予顺铂和立足于泊苷疗程药品，其诱发顺序为CDX3>CDX2>CDX4，相应病变的OS共有9.7.3.5.0.9个月底，预设对CDXs顺利进行人体内药敏试验可以间接反应病变生存时长。

该深入研究显示部分SCLC的水肿滴血CTCs不具干细胞膜特持续性，可顺利进行人体内培养、转变成与原发高度相似的CDXs，为SCLC病变的人体内药敏试验、耐药机制归纳等一系列检查深入研究透过了足量的组织，妥善解决了SCLC病变新种来源太低的问题。

得出结论

从现行的深入研究可以看出，虽然CTCs在SCLC当中的针灸系统设计仍西北面探讨过渡期，但前景广阔。目前，诸多裂解持续性深入研究自始在顺利进行当中，相信随着深入研究的不断深入，CTCs未来会成为SCLC的突破口，期待CTCs在SCLC的领域当中为我们带来惊喜。

编辑： 雪